中国光伏产业在“内忧外患”中蕴育嬗变

1HNMR（400MHz，CDCl3）11.30（1H，s），9.74（1H，s），7.28（1H，d，J=8.7Hz），6.82（1H，d，J=8.7Hz），5.32（2H，s），5.20（2H，s），3.90（2H，q，J=6.9Hz），3.72（2H，q，J=6.9Hz），1.21（3H，t，J=6.9Hz），1.20（3H，t，J=6.9Hz）.13CNMR（100MHz，CDCl3）195，157，156，133，130，117，107，96，93，65，65，15，15。

试验方法检出限为0.01mg／kg，相关系数均大于0.9995。且前处理操作步骤繁琐，使用有机试剂毒性强，安全性低。

1.1.3标准溶液的配制混合标准储备液：分别吸取100L质量浓度1000g／mL氟虫腈、氟虫腈砜、氟虫腈硫醚、氟甲腈标准品，用甲醇定容至10mL，得到质量浓度10g／mL混合标准溶液，于4℃冰箱内保存。GM-K06格明加热破壁料理机。1.2.2精密度测定方法取空白果蔬样品，添加农药混合标准溶液，加标量为0.01和0.02mg／kg，每个浓度做6个平行，根据式（1）计算样品精密度。1材料与方法1.1仪器与试剂1.1.1仪器LCMS-8040液相色谱质谱联用仪（配有电喷雾离子源（ESI））。乙腈、二氯甲烷、甲醇（均为色谱纯）。

试验方法操作简便快捷，安全性高，通过一种检测方法可同时测定果蔬中氟虫腈及其代谢物残留量，准确度和灵敏度高，定量下限低于或等于国家农药残留限量标准。其既能防治地下害虫，又能防治地上害虫，被广泛应用于蔬菜、水果病虫害防治。白酒酿造原料主要有高粱、大麦、小麦、豌豆等，因酿酒原料用量较大，酒厂一般对原料批量购买，进行存储使用，一旦购买原料存在安全隐患或存储不当造成霉变，将产生一些对人体有害的霉菌毒素类物质，其中黄曲霉毒素B1（AFTB1）对人体健康的危害最大，为强毒性、强致癌性物质，已被世界卫生组织癌症机构（IARC）列入一级致癌物。

目前对于黄曲霉毒素的检测方法主要有液相色谱-荧光检测法、酶联免疫吸附筛查法、高光谱检测法、薄层色谱法、同位素稀释液质联用法等仪器设备：高效液相色谱串联质谱仪，万分天平，氮吹仪，免疫亲和柱。1材料与方法1.1材料、试剂与仪器样品：原料（高粱、大麦、小麦），成品酒取自于陕西西凤酒股份有限公司。流动相改为甲醇和0.02%甲酸-2mmol／L乙酸铵，提高了响应强度。

洗脱方式：梯度洗脱，见表1。1.2标准溶液的配制AFTB1标准储备液：称取AFTB1为1.0mg，用乙腈定容至100mL容量瓶，配制成10g／mL标准储备液。

样品经甲醇∶水（7∶3）提取后，净化稀释液由TritionX-100的PBS改为超纯水，黏度变小、易于通过萃取小柱。白酒酿造原料主要有高粱、大麦、小麦、豌豆等，因酿酒原料用量较大，酒厂一般对原料批量购买，进行存储使用，一旦购买原料存在安全隐患或存储不当造成霉变，将产生一些对人体有害的霉菌毒素类物质，其中黄曲霉毒素B1（AFTB1）对人体健康的危害最大，为强毒性、强致癌性物质，已被世界卫生组织癌症机构（IARC）列入一级致癌物。标准品：黄曲霉毒素B1（AFTB1纯度98%），同位素内标13C17-AFTB1（纯度98%）。声明：本文所用图片、文字来源《酿酒科技》，版权归原作者所有。

为了严格控制黄曲霉毒素对人体的危害风险，从而保障消费者的安全，美国、日本、加拿大等多个国家已发布了有关黄曲霉毒素最大限定量的规定，我国GB27612017《食品安全国家标准食品中真菌毒素限量》标准中也规定了粮食中的真菌毒素B1的最大限量，凤香型酿酒原料（高粱、大麦、小麦、豌豆）中的最大限量分别为10g／kg、5g／kg、5g／kg、5g／kg。尽管如此，但仍然存在一定的风险，因此建立准确、高效的检测方法尤为重要。目前对于黄曲霉毒素的检测方法主要有液相色谱-荧光检测法、酶联免疫吸附筛查法、高光谱检测法、薄层色谱法、同位素稀释液质联用法等。准确移取滤液4mL加入12mL的超纯水，混合均匀，待净化。

梯度洗脱，经高效液相色谱分离，在ESI正离子模式下扫描，进行多反应监测模式（MRM）检测。1.4试验方法1.4.1样品提取酿酒原料：准确称取酿酒原料5g样品于50mL离心管中，加入250L同位素内标工作液，旋涡振荡混匀，加入20mL甲醇-水（70+30），涡旋混匀，静置30min后用均质器均质3min，过玻璃纤维滤纸。

该方法样品前处理较简单、检测效率高、准确度高、检测限更低，进一步满足了消费者对食品安全更高的期望和国家对食品检测更严的要求。方法定量限为0.05g／kg，检出限0.01g／kg，均低于其他检测方法。

如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系删除相关链接：乙酸铵，乙腈，甲醇。原料与白酒的加标回收率都在90%～105%，完全符合要求。酒样：称取2g酒样，加入100L同位素内标工作液，加入4mL水，振荡混匀，待净化。酒样：待免疫亲和柱保护液流尽后加入1.4.1中酒样溶液，自然重力下滴，流完后加10mL去离子水淋洗柱子，挤干。同位素内标13C17-AFTB1工作液：准确移取0.5g／mL的13C17-AFTB10.8mL，用乙腈定容至10mL，配制成40ng／mL的同位素内标工作液。1.3仪器参数条件液相条件：色谱柱：Shin-packXR-ODSIIIC18（2.0mmI.D*150mmL.，3.0m）。

流动相：A：0.02%甲酸-2mmol／L乙酸铵，B：甲醇。试剂：甲酸、乙腈、甲醇、乙酸铵（分析纯）、超纯水。

质谱条件：扫描方式：多级反应监测（MRM）。再分别移取AFTB1中间标准液5L、10L、50L、100L、200L、500L、800L、1000L至10mL容量瓶中，分别加500L的40ng／mL同位素内标工作液，用初始流动相定容，配制成浓度为0.05ng／mL、0.1ng／mL、0.5ng／mL、1.0ng／mL、2.0ng／mL、5.0ng／mL、8.0ng／mL、10.0ng／mL的系列标准工作液，过0.22m滤膜，待上机。

AFTB1系列标准工作液：移取AFTB1标准储备液1.0mL至100mL容量瓶中，用乙腈定容，配制成100ng／mL的AFTB1中间标准液。此方法检出限低、准确度高，加强了企业对AFTB1的严格监控。

在国标GB5009.222016方法1：同位素稀释液相色谱-串联质谱法的基础上进行了方法优化、改进，建立了酿酒原料及白酒中黄曲霉毒素B1（AFTB1）的分析方法。结果表明，仪器精密度良好，不同浓度标液相对标准误差（RSD%）均6%。1.4.2净化原料：待免疫亲和柱保护液流尽后加入上述溶液，以1滴／s的流速通过免疫亲和柱，流完后用210mL超纯水淋洗免疫亲和柱，自然重力流干后挤干小柱，准确加入20.5mL甲醇洗脱，再加1mL水挤干，收集于比色试管中，过0.22m有机滤膜，待上机。本研究建立了酿酒原料及白酒中AFTB1的液质联用（HPLC-MS／MS）检测法。

离子源：ESI，正离子模式。加20.5mL甲醇洗脱，再加1mL水挤干，收集于比色试管中，过0.22m有机滤膜，待上机。

所绘制校准曲线线性关系良好，0.05～10g／L范围内相关系数r值0.999实验中的测定结果都会产生不确定度，不确定度的大小反映测试结果的可靠性，只有出具不确定度值，测试结果才算完整有意义。

3、标准品引入的不确定度（1）标准品的纯度引入的不确定度根据标准物质证书的标示，芦丁的纯度为90.5%，其最大允许误差为0.5%，按矩形分布，则标准不确定度计算结果如下：（2）标准品的称量引入的不确定度根据使用的电子天平检定证书，其最大允许误差为0.01mg，称取标准品量为5.4mg，由称量引入的不确定度可按B类评定，按矩形分布考虑，包含因子k=根号3，则其相对标准不确定度为：（3）标准储备液的配制根据JJG1962006《常用玻璃量具检定规程》，A级50mL容量瓶最大允差为0.05mL，按B类评定，按照矩形分布考虑，k=根号3，相对不确定度为：合成标准品引入的相对不确定度：4、标准曲线的拟合引入的不确定度精密吸取芦丁对照品溶液（0.0979mg/mL）4、6、8、10、12、14L，分别测定峰面积，每一浓度测定3次，计算平均峰面积，测定结果见表2。声明：本文所用图片、文字来源《中国食品添加剂》，版权归原作者所有。

标准曲线的标准偏差为：实际测定中，对被测样品测定2次（p=2），平均响应值为1646039，代入拟合曲线，测得供试液中芦丁的估计值为X0=0.0768g/L，得到标准曲线的相对标准不确定度urel（Std）为：5、仪器测量重复性引入的不确定度根据岛津高效液相色谱仪检定证书，定量测量重复性误差为1％，按均匀分布计算，则液相色谱仪的相对标准测量不确定度为：6、计算合成标准不确定度根据各分量的计算结果（见表3），合成相对标准不确定度：7、扩展不确定度与测试结果报告当置信水平P=95%（k=2）时，则相对扩展不确定度U95（y）=urel（y）k=0.01472=0.0294。用最小二乘法拟合芦丁浓度（x）-峰面积（y）曲线，得到曲线方程：y=21969202x-42796（r=0.9999，n=6），即拟合曲线的斜率b和截距a分别为21969202和-42796。如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系相关链接：芦丁，液相色谱仪，国家标准物质网。三、结论本文采用高效液相色谱法测定槐米中芦丁的含量，通过含量测定不确定度的评定，得知该方法的不确定度主要来源于样品制备均匀度，其次为标准曲线的拟合，而最小的分量是标准品引入的不确定度。

根据数学模型计算得到样品中芦丁的含量为：X=18.38%，故其扩展不确定度为：u=18.38%0.0294=0.54%，测定结果报告为：y=（18.380.54）%，k=2。因此，在槐米中芦丁的日常测定中可通过控制样品制备过程和标准曲线拟合过程，降低测定不确定度，提高测定结果的准确性

用最小二乘法拟合芦丁浓度（x）-峰面积（y）曲线，得到曲线方程：y=21969202x-42796（r=0.9999，n=6），即拟合曲线的斜率b和截距a分别为21969202和-42796。根据数学模型计算得到样品中芦丁的含量为：X=18.38%，故其扩展不确定度为：u=18.38%0.0294=0.54%，测定结果报告为：y=（18.380.54）%，k=2。

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